Deracinois B, Camoin L, Lambert M, BoyerJ-B, Dupont E, Bastide B, Cieniewski-Bernard C. O-GlcNAcylation site mapping by (azide-alkyne) click chemistry and mass spectrometry following intensive fractionation of skeletal muscle cells proteins. J Proteomics 2018, 186 : 83-97.
Résumé : Afin de mieux appréhender le rôle de la O-GlcNAcylation, une glycosylation atypique, dans les mécanismes intracellulaires de cellules musculaires squelettiques, il est aujourd’hui indispensable de localiser précisément les sites modifiés par cette glycosylation au niveau de protéines d’intérêt. Grâce à une stratégie de « Click chemistry » et une analyse par spectrométrie de masse, nous avons identifié plus de 620 sites de O-GlcNAcylation au niveau de protéines musculaires (notamment des protéines structurales) extraites de cellules musculaires C2C12 différentiées en myotubes. En particulier, nous avons localisé de nombreux sites de O-GlcNAcylation dans différents domaines d’interaction protéine-protéine, suggérant que la O-GlcNAcylation est un acteur majeur de l’organisation et la réorganisation du sarcomère et par extension, des myofibrilles. De plus, certains sites identifiés correspondent à des sites mutés dans certains pathologies neuromusculaires, notamment les desminopathies, caractérisées par une déstructuration marquée des myofibrilles.